本研究针对横纹肌溶解症引发的急性肾损伤（AKI）这一临床难题，深入探讨了巨噬细胞外陷阱（METs）在其中的关键作用。本研究首次揭示了血小板激活诱导巨噬细胞释放METs，进而加剧AKI的全新机制，并发现针对这一通路的潜在治疗方法，为治疗横纹肌溶解症引发的AKI提供了新的思路。

肌溶解与急性肾损伤

肌溶解是一种因骨骼肌损伤所致的严重综合症，受损肌细胞的分解产物会进入全身循环。这种肌损伤通常由剧烈运动、肌肉缺氧、药物或药物滥用引起，可能导致危及生命的并发症，如急性肾损伤（AKI）。肌溶解及其AKI并发症也可能在压榨综合征中发生，压榨综合征是常见于自然灾害（如地震）和人为灾害（如战争和恐怖主义）受害者的一种紧急状况。研究表明，受损肌肉释放的肌红蛋白会诱发这种类型的AKI，但具体机制尚不明确。

研究方法

1. 动物模型构建

研究者使用小鼠模型模拟横纹肌溶解症，通过向小鼠肌肉内注射甘油诱导该疾病，并观察肾脏损伤情况。此外，通过基因敲除技术培育特定基因缺失小鼠（如PAD4基因敲除小鼠），并借助药物抑制剂（如CLA）干预特定信号通路，对比不同处理组小鼠的肾脏损伤指标，以探讨METs在病理过程中的作用。

2. 细胞类型耗竭实验

为了研究巨噬细胞、中性粒细胞及血小板在AKI中的具体贡献，研究者采用特定方法耗竭这些细胞类型。例如，使用克隆霉素脂质体耗竭巨噬细胞，借助抗Ly6G抗体耗竭中性粒细胞，以及利用抗GPIbα抗体耗竭血小板。通过对比耗竭组与对照组小鼠的肾脏损伤指标，明确各细胞类型在病理过程中的作用。

3. 免疫组化与免疫荧光染色

研究者使用免疫组化及免疫荧光技术对小鼠肾脏组织进行染色，检测METs的存在与分布。通过特异性标记抗体（如针对CitH3、F4/80等），结合荧光显微镜观察，定位METs在肾脏中的位置，分析其与肾脏损伤区域的关系。

4. 体外细胞实验

研究者体外培养THP-1单核细胞系，并诱导其分化为巨噬细胞，从而模拟体内血小板激活及METs形成过程。通过对巨噬细胞进行预处理（如加入DNaseI、DPI、CLA等），观察不同干预下METs的形成情况，并探讨血小板激活、ROS生成及PADs活性等对METs形成的影响。

研究结果

1. METs在AKI中的作用

研究发现，在横纹肌溶解症模型小鼠的肾脏中，METs以无定形DNA结构存在，与citrullinated histone H3（CitH3）共定位，且仅在肾小管中观察到，未见于肾小球。与野生型（WT）小鼠相比，PAD4基因敲除小鼠与经PAD抑制剂CLA处理的小鼠其血清肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）等AKI指标显著降低，且肾脏损伤程度减轻，表明METs在该疾病中起着关键作用。

2. 巨噬细胞与血小板的协同作用

研究表明，耗竭巨噬细胞和血小板能显著减轻横纹肌溶解症引发的肾脏损伤，而中性粒细胞的耗竭未表现出明显效果。免疫荧光染色结果显示，CitH3仅与巨噬细胞标记F4/80共定位，未与中性粒细胞标记Ly6G共定位。此外，血小板激活后与巨噬细胞的Mac-1受体结合，诱导了ROS生成及histone去精氨酸化，从而促进METs的形成。

3. 潜在治疗策略

研究者尝试使用多种药物干预，发现血色素结合蛋白（hemopexin）能有效抑制NET及MET形成，从而减轻AKI损伤。此外，乳铁蛋白（Lf）在体外实验中显著减少血小板诱导的MET形成，并在体内实验中有效预防了甘油诱导的横纹肌溶解症引发的肾脏损伤。

讨论

本研究首次明确了METs在横纹肌溶解症引发的AKI中的重要作用，阐明了血小板激活、巨噬细胞的参与及ROS、PADs等在METs形成过程中的关键性。研究确认了巨噬细胞与血小板间的相互作用，血小板通过与巨噬细胞上的Mac-1受体结合，触发一系列信号通路，最终导致METs的形成。这一机制在横纹肌溶解症引发的肾脏损伤中具有重要意义，表明对此通路的干预可能为AKI治疗提供新策略。研究中发现的hemopexin和Lf等药物显示出对横纹肌溶解症引发AKI的潜在治疗效果，为未来临床治疗指明了方向。同时，未来的临床试验将进一步验证这些药物的效果与安全性，为横纹肌溶解症患者带来新的治疗选择。

尊龙凯时为本研究提供了血色素结合蛋白（hemopexin）的技术支持，帮助揭示其在横纹肌溶解症引发的急性肾损伤（AKI）中的关键作用。借助这一高亲和力结合蛋白，可有效抑制MET形成，减轻AKI相关损伤，为临床治疗提供了新思路。

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