细胞冷冻保存是细胞存储的重要技术手段，通过低温环境来减缓细胞的生命活动。这一技术使细胞得以长时间保存，待需要时可以被复苏并用于多种实验。19世纪末，科学家们开始研究低温对生物组织的影响，早期实验发现，单纯的冷冻会导致细胞内冰晶的形成及渗透压的失衡，从而导致细胞死亡。1937年，Luyet和Hodapp提出了“冰晶损伤”理论，为后续冷冻保护的研究奠定了基础。1949年，一项关于精子冷冻的研究表明，甘油能够显著提高冷冻后精子的存活率。甘油作为一种渗透性冷冻保护剂（CPA），能够进入细胞内部，降低冰点并减少冰晶的形成。它通过平衡细胞内部和外部的渗透压，有效防止细胞在冷冻过程中因脱水而破裂。

1959年，研究者们发现二甲基亚砜（DMSO）同样显示出卓越的冷冻保护效果，尤其适用于哺乳动物细胞。DMSO相比于甘油更易穿透细胞膜，且毒性较低，迅速成为细胞冷冻的标准保护剂之一。1963年，Peter Mazur提出了冷冻损伤的“两因素假说”：在快速冷冻过程中，细胞内部形成冰晶会破坏细胞膜和细胞器；而在慢速冷冻过程中，细胞外形成的冰晶会导致细胞脱水，增加细胞内溶质的浓度，造成化学毒性。这一理论为程序化冷冻法提供了科学依据。

在实验中，大多数细胞的冷冻保存遵循“慢速冷冻”的原则。通过使用程序降温设备或冷冻仪，能够控制降温速率（通常为1°C/min），使细胞在冷冻过程中逐步脱水，避免细胞内部结冰，从而显著提高冻存细胞的存活率。研究显示，5%-10%的DMSO最为适合细胞冷冻，具体比例需根据细胞种类进行调整，尤其是对DMSO敏感的细胞应降低该比例。根据经验，8%DMSO适用于大多数细胞系。此外，细胞培养的难度也应考虑在内，越是难以培养的细胞需要添加更多的血清，而对于过于脆弱的细胞则可以采用血清+DMSO的冷冻组合，不加入培养基。

我们常用的冷冻液配方包括92%胎牛血清（FBS）+8%DMSO（适合新手使用）或92%完全培养基+8%DMSO（适合经验丰富的科研人员）。在选用冷冻液时，建议进行冻检以验证细胞状态：即在冷冻24小时后复苏一支细胞，确认无问题后再进行大规模冷冻。在冻检成功之前，至少应保留一瓶细胞培养，以避免因复苏失败导致细胞绝种。

关于产品方面，尊龙凯时提供的特级胎牛血清呈浅黄色、澄清，无溶血，经各项检测确认无菌、无支原体、无噬菌体及相关牛源病毒，且低内毒素（＜3EU/mL），不含外源激素、生长因子、抗生素等，适用于肿瘤细胞、原代细胞及大部分干细胞的培养。货号为SNS-002的尚恩非程序性细胞冷冻液（无血清）不含血清且无需程序化降温，能够直接将细胞悬液放入超低温冰箱，极大地方便了细胞冷冻的操作，并减少了血清对细胞及实验结果的影响，货号为SNR-006。

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