动物模型在医学研究中扮演着重要角色，成为了模拟人类疾病表现的关键载体。这些模型不仅能够准确复刻复杂的疾病进程和关键特征，还是实验生理学、病理学和治疗学研究的重要工具，尤其是在新药筛选方面表现突出。众多经典的动物模型，例如EAE模型、糖尿病模型、肠炎模型、帕金森模型和阿尔茨海默病模型等，在研究领域内得到了广泛应用。

实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）是多发性硬化症（MS）最常用的动物模型，具备丰富的临床和病理生理特征。EAE模型的多样性能够反映人类MS的各种临床和免疫学特征。通过主动诱导的EAE小鼠模型是最容易生成且结果稳定、可复制的模型，特别适合用转基因小鼠研究药物或特定基因对自身免疫性神经炎症的影响。

在EAE模型的创建过程中，主要使用中枢神经系统匀浆或髓鞘蛋白肽对小鼠进行免疫。由于这些肽的免疫原性较低，因此需要引入强效的佐剂。EAE模型的易感性和表型取决于所选抗原以及小鼠品系，其中C57BL/6小鼠被广泛应用于转基因小鼠的构建，并对髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）具有反应。通过将免疫原性表位MOG35-55悬浮于完全弗氏佐剂（CFA）中进行免疫，并在免疫当天及两天后注射百日咳毒素，模型小鼠在9至14天内会出现“经典”的自限性单相EAE，表现为上升性弛缓性瘫痪。

在进行EAE模型的诱导过程中，有几个关键细节需要特别注意：

一、EAE造模方法

1. 实验动物：选择6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠。

2. 动物适应：在实验环境中适应1周，保持稳定的温度、湿度和光照条件，并确保动物能够自由获取食物和水。

3. EAE模型建立：

（1）MOG(35-55)溶液的配制：将MOG(35-55)多肽粉末溶解于预冷的无菌PBS中，终浓度为20mg/mL。注意：多肽易变性，建议现配现用。

（2）弗氏完全佐剂（CFA）配制：热灭活的结核杆菌悬浮于CFA中，确保所需浓度。注意保护自己，避免与刺激物接触。

（3）抗原乳液的制备：采用1:1的体积比将MOG(35-55)和CFA溶液进行乳化。

（4）制备PTX溶液，稀释至合适浓度，确保操作过程安全。

（5）麻醉小鼠并进行免疫注射，同时注射相关的佐剂以增强模型的诱导效果。

二、EAE模型监测

1. 每日监测小鼠的体重与临床评分。

2. 使用标准化评分系统监测临床表现，记录体重变化，以便判断模型的成功与否。

3. 行为学实验以评估运动功能及抑郁样行为。

4. 组织病理学进行验证，包括切片制备和染色方法以观察炎性细胞浸润与髓鞘脱失。

三、模型成功标准

基础标准：发病率达到80%（临床评分≥2），病理确认有炎性浸润和髓鞘脱失。

高级标准：行为学异常表现明显，分子标志物显示炎症水平显著升高。

四、EAE造模无症状原因分析

常见问题包括：注射部位硬结、无明显EAE症状等。应考虑乳化不当、注射技术问题以及试剂效能。需进行流式细胞术和ELISA等检测以验证免疫反应是否激活。

五、EAE动物模型特色应用案例

通过对C57BL/6小鼠的EAE模型研究，揭示了SPAK信号在调控脉络丛屏障中对MS病理的核心作用，进一步为强效抑制剂的开发提供了临床前证据。相关研究成果表明，EAE模型在药物研发和疾病机制研究中具有重要价值。

在此，尊龙凯时致力于为科学研究提供高品质的动物模型与实验材料，帮助科研人员有效应对各类疾病模型的挑战，为生命科学的进步贡献力量。